微流控傳感與Au納米簇結(jié)合實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞水平H2O2的高靈敏度檢測(cè)
近年來(lái),癌癥對(duì)人類(lèi)健康的威脅日益突出。大部分惡性腫瘤早期無(wú)明顯癥狀,等患者出現(xiàn)特異性癥狀時(shí),腫瘤往往已經(jīng)屬于晚期。
因此,發(fā)展針對(duì)惡性腫瘤的早期診斷新技術(shù)具有迫切的應(yīng)用需求,并引起科研工作者極大的興趣。擴(kuò)散到細(xì)胞膜外的H2O2對(duì)于細(xì)胞遷移、免疫發(fā)生和細(xì)胞間的信號(hào)交流具有重要的調(diào)節(jié)作用。H2O2濃度過(guò)高時(shí)可促使細(xì)胞啟動(dòng)氧化應(yīng)激反應(yīng),與細(xì)胞組成(蛋白質(zhì)、DNA和脂類(lèi)分子)的氧化性損傷、細(xì)胞凋亡以及壞死機(jī)制具有密切的關(guān)聯(lián),對(duì)于腫瘤發(fā)生與腫瘤細(xì)胞遷移存在影響。另一方面,H2O2擴(kuò)散快,易與細(xì)胞外還原性物質(zhì)反應(yīng)而湮滅。傳統(tǒng)的分析方法基于儀器設(shè)備的局限性,只能對(duì)大量的群體細(xì)胞外分泌的H2O2進(jìn)行檢測(cè),無(wú)法揭示單個(gè)細(xì)胞分泌H2O2的差異。
蘇州大學(xué)的劉堅(jiān)教授團(tuán)隊(duì)與陳堅(jiān)教授合作,將納米材料與微流控技術(shù)相結(jié)合,成功制得了一種能在單細(xì)胞水平實(shí)現(xiàn)高靈敏檢測(cè)H2O2的生物傳感器。其傳感器集成了以辣根過(guò)氧化物酶(HRP)為模板生物礦化的方法合成的熒光納米金簇(HRP-AuNCs),能夠在容積僅為納升(nL)的微液滴中通過(guò)熒光變化靈敏地檢測(cè)單細(xì)胞外分泌H2O2的含量,檢測(cè)極限達(dá)1 nM。實(shí)驗(yàn)比較了多種腫瘤細(xì)胞(包括正常細(xì)胞對(duì)照)在有無(wú)外刺激的條件下外分泌H2O2的情況,在單液滴/單細(xì)胞水平上對(duì)所分泌的H2O2含量進(jìn)行精確測(cè)量,并且對(duì)該傳感技術(shù)的檢測(cè)特異性進(jìn)行研究,為研究腫瘤細(xì)胞復(fù)雜的異質(zhì)性提供了新型的的研究工具。
這一成果近期發(fā)表在Analytical Chemistry上,文章的第一作者是蘇州大學(xué)的碩士研究生沈瑞。
該論文作者為:Rui Shen, Peipei Liu, Yiqiu Zhang, Zhao Yu, Xuyue Chen, Lu Zhou, Baoqing Nie, Jian Chen, Jian Liu